大腸菌の取り扱い

一般的な注意事項

グリセオール保存

  1. 1.5mlカルチャーに0.5mlの60% glycerol*を加える。
  2. よくvortexする。
  3. 凍結保存チューブにプラスミドベクター名(入っていれば)、菌種、日付を記入。
  4. 凍結保存チューブに適量いれ、-80℃(Rebco)に保存。
  5. 再度取り出すときは、白金耳で少量掻き取り、適当なプレート(LB, LA plate)に引いてから37℃一晩培養。その後single colonyをpick upして使う。
*60% glycerol:グリセオール6にDW4を加え、オートクレーブしたもの。グリセオールは非常に粘稠だが、大腸菌保存目的の場合、それ程神経質にならなくともよい。